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解析鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1

 更新時(shí)間:2022-08-09    點(diǎn)擊量:809
  鼠抗黃曲霉毒素B1單克隆抗體中的黃曲霉毒素B1存在于谷物、堅(jiān)果、棉花籽及其他食品或飼料中,具有很強(qiáng)的致癌性,對(duì)人和若干動(dòng)物具有強(qiáng)烈的毒性,其毒性作用主要是對(duì)肝臟的損害。本抗體為黃曲霉毒素B1單克隆抗體,該抗體可應(yīng)用于ELISA、膠體金、免疫親和柱層析等免疫檢測(cè)。
 
  黃曲霉毒素B1在自然界分布的黃曲霉中,約有20%的菌株能產(chǎn)生黃曲霉毒素。其中花生、玉米、黃豆及棉籽等作物與其副產(chǎn)品易感染黃曲霉毒素,含黃曲霉毒素量較多,食入后在動(dòng)物體內(nèi)主要存在于如肝臟、尿與糞便中。黃曲霉毒素是一種肝臟毒素,能引起肝細(xì)胞變質(zhì)、壞死、出血;目前,黃曲霉毒素的酶聯(lián)免疫法,免疫膠體金法等檢測(cè)方法均需要黃曲霉毒素抗原抗體。
 
  黃曲霉毒素B1的合成方法
 
  (1)黃曲霉毒素半抗原合成
 
  20-100mg黃曲霉毒素溶于丙酮中,10%硫酸中,于60℃攪拌反應(yīng),3h后,蒸干丙酮,洗滌4次,蒸干后得到黃曲霉毒素半抗原。
 
  (2)黃曲霉毒素全抗原(人工抗原、*抗原、酶標(biāo)抗原)合成
 
  將黃曲霉毒素半抗原與牛血清白蛋白偶聯(lián)得到免疫抗原。
 
  取60mg牛血清白蛋白溶于9.5mlPBS(0.01mol/L,pH5.0)溶液中,加入50微升室溫?cái)嚢?h,用0.01mol/LPBS透析3天,每天換3次透析液,得到黃曲霉毒素與牛血清白蛋白的免疫抗原。
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